Q1：在实际项目中，如何选择合适的展示技术？

A1：这通常取决于你的核心目标：

（1）如果目标是快速、低成本地从大规模文库中初步筛选候选抗体，噬菌体展示因其成熟的流程和大库容量，通常是首选。

（2）如果需要对候选抗体进行精细的亲和力、稳定性优化，或靶点需要复杂翻译后修饰，酵母展示系统因其真核环境和流式细胞术的定量能力更为合适。

（3）如果目标是筛选具有极高亲和力的结合蛋白，或需要对特殊蛋白（如毒性蛋白）进行体外进化，核糖体展示的无细胞、超大库容优势就体现出来了。

Q2：为什么酵母展示更适合抗体亲和力成熟？

A2：这主要得益于其与流式细胞术（FACS） 的无缝结合。FACS可以同时定量检测酵母细胞表面抗体的表达量（如通过HA/c-myc标签）和与抗原的结合力（如通过荧光标记抗原），从而能够精确地分选出那些结合力强而表达量又高的优质克隆。这种定量筛选能力是噬菌体展示的定性“淘选”难以实现的。

Q3：核糖体展示的“库容量极大”具体指什么？相比有何不同？

A3：核糖体展示的库容量理论上可达10¹⁴甚至更高。而噬菌体和酵母展示的库容量（通常在10⁸-10¹¹）受制于细菌或酵母的转化效率，即将外源DNA导入活细胞的效率。核糖体展示完全在体外进行，只需通过PCR扩增即可构建文库，完全绕过了细胞转化的步骤，因此能轻易构建并筛选超大规模的文库。

Q4：这些技术除了开发抗体，还能用于其他目的吗？

A4：这些平台都非常灵活。噬菌体展示同样广泛用于筛选多肽、酶等。酵母展示可用于改造受体、酶等蛋白质的性质。核糖体展示尤其适合筛选基于非抗体支架（如Affitin）的高稳定性结合蛋白，这在最新研究中已有成功应用。

Q5：三种展示技术各自的优势是什么？

A5：噬菌体展示是高通量初步筛选的“主力军”，成熟且高效。

酵母展示是抗体优化的“精密实验室”，擅长定量分析和改造。

核糖体展示是构建超大型文库和进行体外进化的“特种平台”，能力强大但操作要求高。

这三种技术在研发流程中经常被组合使用，例如先用噬菌体展示进行初筛，再用酵母展示进行亲和力成熟。