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抗体亲和力成熟服务

抗体亲和力成熟服务介绍

卡梅德科技(KMD Bioscience)多年来致力于抗体领域研究。抗体亲和力是决定抗体药物结合活性、药效强度与临床应用潜力的核心参数。经CDR移植改造的人源化抗体,常因框架区序列替换改变抗原结合构象,出现不同程度的亲和力下降。因此,通过体外亲和力成熟技术定向提升抗体亲和力,是抗体优化阶段的关键环节。

卡梅德科技具备成熟的噬菌体展示平台与亲和力表征体系,可提供多物种来源抗体的亲和力成熟一站式服务。我们可构建库容超1010独立克隆的突变体文库,通过多轮严谨的筛选与鉴定,多数项目可实现抗体亲和力提升1-3个数量级,可达纳摩尔甚至皮摩尔级;同时可配套完成抗体序列分析、可溶性表达、亲和力与特异性验证等全流程实验,为客户定制个性化优化方案,高效支撑抗体药物的早期研发。


噬菌体抗体文库技术 — 抗体亲和力成熟服务

体内亲和力成熟是体液免疫的自然进化过程。在生发中心应答中,抗原活化的B细胞其抗体可变区(尤其是互补决定区CDR)会发生体细胞高频突变,经抗原的持续定向选择,表达高亲和力抗体的B细胞得以存活扩增,最终实现抗体亲和力的逐步提升。

卡梅德科技依托噬菌体展示抗体文库技术,结合错配PCR、定点突变、CDR区饱和突变等多种突变策略,可在体外精准模拟“突变-筛选-富集”的进化过程,定向获得高亲和力抗体突变体。


抗体亲和力成熟服务的技术流程


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常用的抗体体外亲和力成熟技术

在抗体体外亲和力成熟过程中,选择突变区域以及如何引入突变是一个关键问题,目前的突变策略主要分为三大类,分别为:随机突变、置换和定向突变、易错PCR。

类型

特点

易错PCR

* 是目前常用的抗体突变技术,可以在抗体基因的全长或部分区域随机引入突变。在聚合酶对目的基因扩增时,通过应用错配率高的聚合酶或调整反应条件等,以一定的频率向目的基因中随机引入突变,并通过多轮PCR反复进行随机诱变,累计突变效应,最终获得目的蛋白的随机突变体

链置换

* 链置换是保留某个特定抗体的重链或轻链,另一条链与一个随机化的互补链进行组合,经过噬菌体抗体库筛选从中筛选更高活性的突变株

定点突变

* 体细胞高频突变发生区域主要集中在与抗原直接接触的CDR区。在抗体的亲和力体外成熟过程中,CDR区是常选用的定点突变区域,对CDR进行定点突变时,可以对多个CDR进行平行突变或进行逐步优化

DNA改组

* DNA改组技术是对同源的抗体基因,采用脱氧核糖核酸酶I将其切割成不超过50bp的片段,再随机组合后进行PCR扩增成完成的抗体基因的技术


交付结果

交付内容

经亲和力优化的抗体序列

高亲和力的纯化抗体

完善的实验报告和数据:包括SDS-PAGE及亲和力分析等结果


服务优势

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