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兔单B细胞单抗制备服务

兔单B细胞单抗制备服务介绍

卡梅德科技(KMD Bioscience)多年来致力于抗体制备研究,拥有从业经验丰富的技术团队、成熟稳定的工艺体系与完备的抗体制备实验设备,可提供小鼠、兔、羊驼、牛、羊、鸡等多物种来源的重组单克隆抗体制备服务。

相较于传统小鼠单克隆抗体,兔源单克隆抗体在结合亲和力与抗原识别能力上表现出显著优势,目前已广泛应用于基础生命科学研究、体外诊断试剂开发及治疗性抗体候选分子筛选等领域。在结合亲和力层面,兔单克隆抗体的解离常数(KD)普遍可达皮摩尔量级,而多数小鼠单克隆抗体的亲和力水平处于纳摩尔至亚纳摩尔区间,兔单抗的抗原结合亲和力约为小鼠单抗的百倍。在表位识别特性方面,兔的天然免疫系统能够精准分辨抗原表面的细微表位差异,可诱导产生针对特定表位的高特异性抗体;同时其免疫应答具备更宽泛的表位覆盖能力,更易获得识别不同抗原表位的多样化阳性克隆。


兔单B细胞技术抗体(single b)制备

卡梅德科技(KMD Bioscience)的兔源单B细胞抗体制备服务,基于流式细胞分选技术平台搭建。通过分选单个抗原特异性B淋巴细胞,扩增其抗体可变区编码基因,再经重组表达系统获得对应的单克隆抗体。基于单B细胞技术,可在动物免疫完成后,从外周血中分离外周血单个核细胞(PBMC),并从中分选抗原特异性阳性B细胞,直接克隆抗体可变区序列,最终获得的兔源单克隆抗体兼具抗原识别高特异性、结合高亲和力与良好生物学活性的突出优势。

卡梅德科技可提供包含抗原设计、合成与修饰,定制化动物免疫,抗原特异性单 B 细胞富集与分选,抗体重组表达与纯化以及多维度功能验证在内的一站式全流程服务,为您的科研保驾护航。


兔单B细胞单抗制备服务流程

兔单B细胞单抗制备服务流程.png

兔单B细胞单抗制备服务内容

步骤

服务内容

交付材料

周期

动物免疫

PBMC分离

免疫兔子4-5次

ELISA效价测定

外周血采集

PBMC分离

ELISA检测结果

标准实验记录

PBMC,1×10^6 cells*10支

4-10周

可选择标准免疫或快速免疫

流式分选

PBMC流式分选

标准实验结果记录

1-2个工作日

单B细胞

培养筛选

5~20板96孔板单B细胞培养和ELISA筛选

阳性克隆筛选结果

标准实验记录

2~3周

可选其他增值验证方法

阳性克隆测序

至少20个阳性克隆进行RT-PCR和测序

RT-PCR结果

测序原始数据

特异性序列

标准实验记录

1周

载体构建

抗体表达纯化

哺乳表达载体构建

细胞转染

ELISA验证

至少3个阳性克隆序列

表达载体

纯化抗体500ug/个阳性克隆

ELISA检测结果

标准实验报告

5~6周

可选其他增值验证方法


单B细胞单抗制备优势

类目

单B细胞技术(single b)

杂交瘤技术

噬菌体展示技术

抗体

天然

天然

非天然

抗体亲和力

高

高

中等

可成药性

高

高

低

时间

16~20周,可选快速免疫

20~26周,可选快速免疫

16~20周,可选快速免疫

抗体基因序列

直接获得

需要进一步测序

直接获得

抗体多样性

高

中等

中等

所能筛选的种属

不限种属

鼠、兔

不限种属


兔单B细胞单抗制备服务优势


兔单克隆抗体定制服务优势.png

样品要求

客户提供

要求

重组蛋白

* ≥2.5 mg,要求蛋白纯度>85%,蛋白要求分子量大于10 kDa,可溶性蛋白浓度在0.5~5mg/mL之间。若要求抗原亲和纯化,需额外提供10 mg左右重组蛋白

多肽与小分子

* 裸肽≥10 mg,多肽纯度>90%,不少于10个AA,偶联KLH/BSA/OVA或其他载体蛋白;小分子需要预先对结构进行评估


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