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鼠单B细胞单抗制备服务

鼠单B细胞单抗制备服务介绍

卡梅德科技(KMD Bioscience)多年来致力于抗体制备研究,拥有从业经验丰富的技术团队、成熟稳定的工艺体系与完备的抗体制备实验设备,可提供小鼠、兔、羊驼、牛、羊、鸡等多物种来源的重组单克隆抗体制备服务。

小鼠是单克隆抗体制备领域应用最为广泛的经典免疫宿主。其繁殖速率快、个体体型小,免疫研发周期短,且饲养条件易于标准化管控。同时常用近交系小鼠经数十年的科研与工业应用验证,遗传背景高度均一稳定,免疫应答规律清晰可重复。基于小鼠体系制备的单克隆抗体,具备抗原识别特异性强、批次间性能差异小、非特异性背景反应低等技术特点。单B细胞抗体制备技术相较于传统的方法具有速度快、高通量、特异性强等优势。该技术通过分选抗原特异性单个B淋巴细胞,直接经PCR扩增获取抗体可变区编码基因,再依次完成序列测定、重组表达载体构建、细胞水平表达鉴定及抗体纯化等核心工序。依托该技术平台,卡梅德科技可为客户提供全流程一站式鼠源单克隆抗体制备服务,能够在短周期内交付兼具高抗原特异性与高结合亲和力的鼠源重组单克隆抗体。


单B细胞单抗制备服务内容

步骤

服务内容

交付材料

周期

动物免疫

PBMC分离

免疫小鼠4-5次

ELISA效价测定

外周血采集

PBMC分离

ELISA检测结果

标准实验记录

PBMC,1×10^6 cells*10支

4-10周

可选择标准免疫或快速免疫

流式分选

PBMC流式分选

标准实验结果记录

1-2个工作日

单B细胞

培养筛选

5~20板96孔板单B细胞培养和ELISA筛选

阳性克隆筛选结果

标准实验记录

2~3周

可选其他增值验证方法

阳性克隆测序

至少20个阳性克隆进行RT-PCR和测序

RT-PCR结果

测序原始数据

特异性序列

标准实验记录

1周

载体构建

抗体表达纯化

哺乳表达载体构建

细胞转染

ELISA验证

至少3个阳性克隆序列

表达载体

纯化抗体500ug/个阳性克隆

ELISA检测结果

标准实验报告

5~6周

可选其他增值验证方法


鼠单B细胞技术(single B)抗体制备

卡梅德科技(KMD Bioscience)的鼠源单B细胞抗体制备服务,基于流式细胞分选技术平台搭建。通过分选单个抗原特异性B淋巴细胞,扩增其抗体可变区编码基因,再经重组表达系统获得对应的单克隆抗体。基于单B细胞技术,可在动物免疫完成后,从免疫小鼠外周血中分离外周血单个核细胞(PBMC),并从中分选抗原特异性阳性B细胞,直接克隆抗体可变区序列,最终获得的鼠源单克隆抗体兼具抗原识别高特异性、结合高亲和力与良好生物学活性的突出优势。

卡梅德科技可提供包含抗原设计、合成与修饰,定制化动物免疫,抗原特异性单 B 细胞富集与分选,抗体重组表达与纯化以及多维度功能验证在内的一站式全流程服务,为您的科研保驾护航。

 

制备流程:

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单B细胞单抗制备服务优势


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单B细胞单抗制备优势

类目

单B细胞技术(single b)

杂交瘤技术

噬菌体展示技术

抗体

天然

天然

非天然

抗体亲和力

高

高

中等

可成药性

高

高

低

时间

16~20周,可选快速免疫

20~26周,可选快速免疫

16~20周,可选快速免疫

抗体基因序列

直接获得

需要进一步测序

直接获得

抗体多样性

高

中等

中等

所能筛选的种属

不限种属

鼠、兔

不限种属


样品要求

客户提供

要求

重组蛋白

* ≥2.5 mg,要求蛋白纯度>85%,蛋白要求分子量大于10 kDa,可溶性蛋白浓度在0.5~5mg/mL之间。若要求抗原亲和纯化,需额外提供10 mg左右重组蛋白

多肽与小分子

* 裸肽≥10 mg,多肽纯度>90%,不少于10个AA,偶联KLH/BSA/OVA或其他载体蛋白;小分子需要预先对结构进行评估


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