牛单B细胞单抗制备服务基于流式细胞分选技术进行单B细胞单抗制备,利用每个B细胞只含有一个功能性重链可变区DNA序列和一个轻链可变区DNA序列且只产生一种特异性抗体的特性,从动物的淋巴组织中收集B细胞,通过单克隆化技术从单个抗体分泌B细胞中扩增重链和轻链可变区基因,从而将收集到的B细胞扩增成单一来源的克隆群,然后选择抗体生产宿主,使其产生抗体。
牛单B细胞单抗制备服务基于流式细胞分选技术进行单B细胞单抗制备,利用每个B细胞只含有一个功能性重链可变区DNA序列和一个轻链可变区DNA序列且只产生一种特异性抗体的特性,从动物的淋巴组织中收集B细胞,通过单克隆化技术从单个抗体分泌B细胞中扩增重链和轻链可变区基因,从而将收集到的B细胞扩增成单一来源的克隆群,然后选择抗体生产宿主,使其产生抗体。
牛单B细胞技术具体特异性强,批次间差异小等特点,由该方法制得的牛单克隆抗体是常用的单克隆抗体。目前,牛单B细胞技术制备的抗体在生物医学研究、诊断工具和治疗药物研发等方面有广泛应用。
①动物免疫、PBMC分离。选择牛作为实验动物,并通过注射目标抗原(通常是目标蛋白或多肽)来激发免疫反应,免疫牛4-5次,以此激活牛的免疫系统,导致B细胞产生抗体。然后进行ELISA效价测定、免疫牛外周血采集和PBMC分离。
②流式分选。用PBMC流式分选方法来分选抗原特异性的单个B细胞。
③单B细胞培养筛选。将分选的单个B细胞先在体外进行5~20板96孔板单B细胞培养,然后将细胞培养的上清进行ELISA筛选或者FACS等前期介入检测。
④阳性克隆测序。挑选检测的至少20个阳性细胞克隆进行RT-PCR,来扩增其抗体可变区基因,然后进行测序。
⑤载体构建、抗体表达纯化。最后进行抗体的哺乳表达载体构建、细胞转染和ELISA验证。

步骤 | 具体内容 | 周期 |
抗原准备与动物 | * 注射抗原,进行5-7次免疫 * 提供详细的免疫报告 | 10-14周 |
细胞分离 | * 收集免疫后的牛血进行细胞分离 | 1-2周 |
基因扩增 | * PCR扩增目的基因 | 4-5周 |
融合抗体表达 | * 载体构建 | 6-7周 |
功能验证 | * SPR/BLI验证 | 1周 |
--所有单克隆抗体超长CDR3H序列信息及原始数据
--来自血液、淋巴和脾细胞的B细胞(>5x10^6/项目);cDNA文库,3-4瓶/项目
--构建完成的表达载体
--高纯度融合抗体(>90%)
--实验报告和原始数据:包括SDS-PAGE、ELISA检测等结果,并根据客户需求,提供抗体验证结果,如Western Blot、SPR等
--PM级亲和力与高特异性
--序列多样性
--多种抗体表达验证选择
--高细胞融合存活率:保障实验成功率。
--严格的QC体系与标准化操作流程:确保交付抗体质量可靠。
--多样化的抗体纯化技术与方案:满足不同纯度和规模要求。
--多样化抗原免疫:接受蛋白、多肽及各类小分子抗原,提供从抗原制备到抗体生产的一站式服务。
--多样化抗体检测方法:提供ELISA、WB、SPR/BLI等抗体质量检测技术,可全面评估抗体质量。
--完善的平台:拥有成熟的抗体和蛋白平台,多种表达系统可选,多种免疫途径,并同步实验,确保单抗高质量产出。
--完整的结果分析:提供包含详细实验过程的完整报告。
--定制服务:提供个性化定制服务,满足客户的实际需求。
卡梅德生物在鼠单B细胞单抗制备服务方面拥有丰富的经验和严格的质控体系,能够为客户提供个性化定制服务满足客户的实际...
卡梅德生物在羊驼单B细胞单抗制备服务方面拥有丰富的经验和严格的质控体系,能够为客户提供个性化定制服务满足客户的实...
卡梅德生物在牛单B细胞单抗制备服务方面拥有丰富的经验和严格的质控体系,能够为客户提供个性化定制服务满足客户的实际...
卡梅德生物在兔单B细胞单抗制备服务方面拥有丰富的经验和严格的质控体系,能够为客户提供个性化定制服务满足客户的实际...
0