羊驼体内天然存在两种类型的抗体:(i)是由两条重链与两条轻链组装形成的经典四聚体 IgG 抗体,以及(ii)为天然缺失轻链及重链CH1结构域的重链抗体(heavy chain antibody, hcAb),仅由两条重链通过二硫键构成同源二聚体结构。重链抗体的重链可变区为独立的单结构域功能单元,专属命名为 VHH,也就是常说的纳米抗体或单域抗体(single domain antibody, sdAb)。相较于传统全长抗体,羊驼源抗体尤其是VHH单域抗体理化稳定性更强,基因工程改造操作更便捷,抗原识别特异性优异,可在原核及真核表达系统中实现高效重组表达。同时,VHH的氨基酸序列与人源抗体重链可变区VH3家族具有高度同源性,更易于进行人源化改造,目前已广泛应用于抗体药物研发领域。
单B细胞抗体制备技术是近年发展成熟的新一代抗体发现技术。卡梅德科技依托该技术平台,从免疫后羊驼的外周血或免疫淋巴器官中分离淋巴细胞,通过流式分选技术精准富集并分离抗原特异性单个B淋巴细胞;可根据项目需求开展单细胞体外培养,通过培养上清的抗原结合实验鉴定抗体的结合特异性。后续通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)搭配抗体特异性引物,扩增获得抗体可变区编码基因,将目的基因定向克隆至表达载体后,可在客户指定的表达系统中完成重组抗体的表达与纯化;最终纯化产物通过ELISA等方法完成抗原结合活性验证。凭借标准化的技术流程与成熟的开发体系,我们交付的羊驼源单克隆抗体性能稳定,项目整体开发成功率高。

图1 A,传统IgG;B,传统抗体Fab片段;C,传统抗体的单链Fv片段;D,重链抗体或驼类抗体;E,驼类抗体的VH区域或单域抗体(sdAb)