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慢病毒包装服务
慢病毒包装服务介绍

卡梅德科技(KMD Bioscience)多年从事蛋白表达的研究,拥有丰富的病毒载体研发经验,建立了完整的慢病毒包装技术平台,提供从载体设计、病毒包装、纯化处理、转导验证的全程一站式技术服务。在慢病毒包装系统基础上,利用高滴度工艺以及高标准检测,从源头上确保病毒滴度、细胞毒性等相关技术指标,保证慢病毒感染具有高感染活性、低细胞毒性及批次间稳定性,使整个实验的成本更低,并最大程度的保护珍贵的原代细胞或干细胞样本,为客户的研究保驾护航!

卡梅德科技采用第二代、第三代自失活慢病毒感染载体系统,完成包括人源细胞(HEK293T、HUVEC等)、动物细胞(小鼠原代神经元、大鼠心肌细胞等)及难转染细胞(原代T细胞、干细胞等)的慢病毒包装,每一批病毒均经过滴度测定、无菌检测、支原体检测以及插入片段验证,保证了病毒的安全性、有效性和目的基因的正确表达,为您的科学研究打好坚实基础。


慢病毒载体介绍

慢病毒载体(Lentiviral vector)是一种基于人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)改造而成的基因治疗载体,属于逆转录病毒科,具有高效转导分裂及非分裂细胞的能力。相比瞬时转染,慢病毒载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上稳定持续表达,且免疫原性低,适用于体内体外实验。

HIV-1病毒基因组为长度约9.7 kb的单链RNA,两端各含反向末端重复序列(LTR),核心区包含gag、pol、env3三个结构基因以及tat、rev、nef、vif、vpr和vpu六个调节基因。基于安全性与包装效能优化,现代工程化载体通过系统性删除致病性调节基因,仅保留gag、pol及rev等必需元件,目前已开发至第二代(三质粒系统)和第三代(四质粒自失活SIN系统)包装系统,满足客户不同的实验需求。


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服务类型

卡梅德科技根据客户不同研究目标的需求,可以提供过表达慢病毒与shRNA慢病毒两类包装服务,实现目的基因在宿主细胞内的不同表达水平,为客户的实验研究提供灵活可靠的病毒工具。


服务类型

过表达慢病毒

shRNA慢病毒

制备方法

将目的基因克隆至慢病毒载体,通过病毒感染使基因在靶细胞中稳定、高效地过量表达。

将针对靶基因设计的shRNA序列克隆至慢病毒载体,在细胞内加工为siRNA,通过RNAi机制特异性降解靶mRNA,实现基因敲低。

核心机制

基因的稳定整合与

强制表达

RNA干扰(RNAi)

主要适用范围

*功能获得性研究:研究基因过表达对细胞表型、信号通路、分化等的影响;

*报告基因系统:表达荧光蛋白(如GFP)或荧光素酶(Luciferase)进行示踪、分选或检测;

*蛋白生产与研究:在细胞中大量生产特定蛋白,用于功能研究或抗体制备。

*基因治疗/细胞治疗研究:在干细胞或免疫细胞中表达治疗性基因。

*功能缺失性研究:敲低目标基因,研究其功能缺失对生命活动的影响;

*药物靶点验证:验证特定基因是否为潜在治疗靶点;

*信号通路研究:通过敲低通路中的关键基因,解析通路调控机制。

*合成致死研究:寻找癌症治疗的新靶点。

实验周期

相对较短:

载体构建成功后,病毒包装和表达验证流程相对直接。

相对较长:

需要额外的时间进行高效且特异性的shRNA序列筛选与验证。

优势

表达强度高、效果稳定持久、成功率较高

基因敲低、可诱导系统、高通量筛选


服务流程

慢病毒包装系统是由转移质粒、包装质粒和包膜质粒组成,其中二代三质粒系统和三代四质粒系统应用最为广泛。卡梅德科技根据客户提供目的基因或设计合成shRNA,构建目的载体,使用去内毒素试剂盒进行大量抽提,再将慢病毒质粒系统共转染293T细胞,收集病毒上清并浓缩纯化,最后进行滴度测定,交付样品


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服务优势

--卡梅德科技专注提供病毒包装服务十余年,经验丰富

--提供从载体设计、构建合成到病毒包装、浓缩纯化和滴度测定一站式服务,缩短科研周期

--多种病毒载体系统可供选择,根据客户需求提供个性化定制方案

--可交付≥1×108 TU/mL滴度慢病毒颗粒,安全运输

--完善的客户服务体系,技术支持、项目跟进、售后服务获得客户一致好评


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