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磷酸化抗体制备服务

磷酸化抗体制备服务 介绍

卡梅德生物(KMD Bioscience)多年来致力于抗体制备研究。我们拥有专门的抗体制备团队,成熟的抗体制备技术,完善的抗体制备平台,能够为客户提供多种磷酸化抗体制备服务。

蛋白磷酸化在细胞信号传导及凋亡过程中起到了重要作用,是维系细胞生命的活动调控中枢。磷酸化抗体是研究蛋白质磷酸化的重要工具。卡梅德生物凭借多年的项目经验,能够开发出性能不弱于细胞信号转导公司(CST)磷酸化多克隆抗体和单克隆抗体。我们提供的针对特定磷酸化位点的多克隆及单克隆抗体定制服务,目前项目全部达标。

卡梅德生物的科学家能够为客户提供一站式磷酸化抗体制备服务,包括磷酸化多肽设计、实验方案设计及相关验证服务,包括磷酸化与非磷酸化的抗原交叉反应,Western Blot和免疫组化等,以满足不同客户的项目需求。

磷酸化抗体简述

翻译后修饰是调节蛋白质功能的重要方式,参与和调节许多关键的生命活动过程。蛋白磷酸化是重要的翻译后修饰方式,主要涉及到蛋白生物活性水平的调节,包括激活或抑制蛋白质活性,从而进一步调节细胞信号转导通路。在细胞水平上准确地定量磷酸化蛋白质对于破译和了解细胞功能至关重要。

免疫原经过磷酸化,用其制备的抗体就称之为磷酸化抗体。磷酸化抗体可以特异性的识别蛋白磷酸化位点,可用于区分蛋白质磷酸化及非磷酸化的存在形式,对磷酸化蛋白进行定性和定量分析。

卡梅德生物为客户提供不同方案的磷酸化抗体制备服务,包括传统抗体制备,如鼠单克隆杂交瘤制备技术与多克隆抗体制备技术,以及非传统的重组抗体制备技术。

基于传统抗体制备技术的磷酸化抗体制备服务包括:磷酸化位点的分析,磷酸化与非磷酸化多肽抗原设计与合成,动物免疫与血清效价评价以及抗体纯化与配对等。交付的抗体通过磷酸化多肽与非磷酸化多肽的双重检测确认,保证抗体交付质量合格。


磷酸化抗体制备服务流程

项目名称

服务内容

交付结果

抗原设计与合成

* 客户提供抗原(多肽,蛋白),纯度>90%

* 卡梅德设计与合成磷酸化与非磷酸化抗原(可选)

(抗原由卡梅德制备)

* 磷酸化与非磷酸化抗原的MS和HPLC报告

* 5 mg磷酸化多肽,纯度>90%

* 5 mg非磷酸化多肽,纯度>90%

抗原偶联

*客户提供偶联抗原(KLH/OVA偶联磷酸化多肽5mg,BSA偶联磷酸化多肽5mg,BSA偶联非磷酸化多肽5mg)

*卡梅德进行多肽偶联(可选)

* 5 mg KLH/OVA磷酸化多肽,纯度>90%

* 5 mg BSA磷酸化多肽,纯度>90%

* 5 mg BSA偶联非磷酸化多肽,纯度>90%

单克隆抗体制备

* 免疫5 只Balb/c 小鼠(采用特定的小鼠免疫佐剂,20天即可快速产生高抗体滴度血清),ELISA检测血清效价

* 取脾细胞进行细胞融合(sp2/0或者NS0瘤细胞)

* 细胞克隆与亚克隆,含细胞培养上清抗体ELISA效价与交叉性验证

* 3-5个抗体杂交瘤细胞株

* 1-3 mg纯化抗体

* ELISA报告

* 不少于一株单克隆抗体识别磷酸化与非磷酸化抗原效率相差1000倍

* Western Blot验证报告(可选)

多克隆抗体制备

* 免疫2-3 新西兰大白兔(采用我司的兔专用免疫佐剂,28天可产生高抗体滴度),ELISA检测血清效价

* 血清收集与ELISA效价检测

* 抗原亲和纯化或protein A纯化

* 抗体使用稀释倍数验证(客户需提供实验样品)

* 1-2ml免疫前血清

* 1-5 mg纯化抗体

* ELISA报告

*抗体识别磷酸化与非磷酸化抗原效率相差1000倍

*Western Blot验证报告(可选)


磷酸化抗体制备服务优势

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