背景介绍

免疫荧光（Immunofluorescence，IF）是一种将免疫学方法与荧光标记技术相结合的实验技术。其原理是基于抗原与抗体之间的特异性结合。首先，将已知的抗原或抗体标记上荧光素，制成荧光标记物。这些荧光标记物作为分子探针，与细胞或组织内的相应抗原或抗体结合。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素，利用荧光显微镜观察样本，荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光，从而可以观察荧光所在的细胞或组织，确定抗原或抗体的性质和定位。

卡梅德生物（KMD Bioscience）从事分子生物学研究多年，我们的分子生物学平台拥有高学历和分子生物学操作经验丰富的技术人员，科研团队可根据客户的个性化研究需求，提供专业的免疫荧光技术服务，包括实验方案设计、样品处理、荧光标记及图像采集分析等完整的技术支持，以确保实验数据的准确性和可靠性，满足客户在基础研究和应用研究领域的不同需求。

免疫荧光服务介绍

直接免疫荧光：将荧光素直接标记在特异性抗体上，然后将这种荧光标记的抗体直接与样本中的抗原结合。在荧光显微镜下，通过观察荧光的发出情况来判断抗原的存在和位置。

间接免疫荧光：首先使用未标记的特异性抗体（一抗）与样本中的抗原结合，然后使用荧光素标记的二抗与一抗结合。通过荧光显微镜观察荧光信号，从而间接检测抗原。

服务流程

图1.细胞免疫荧光服务流程图

免疫荧光常见问题解答

1. 荧光信号弱或无信号

答：可能是抗原表达量低，建议增加样本量或使用信号放大技术；细胞或组织未充分固定，导致抗原表位被破坏，建议根据抗体说明书选择合适的固定方法；抗体稀释不当，建议根据抗体说明书调整稀释比例。

2. 如何选择免疫荧光抗体？

答：首先，确认抗体测试图像的有效性；其次，评估图像质量是否达标；第三，验证图像结果的准确性，了解目标蛋白定位和表达水平。第四，抗体是否在天然细胞环境中得到验证，以提高实验可靠性。

3. 直接免疫荧光和间接免疫荧光哪个更好？

答：间接免疫荧光使用未标记的一抗和标记的二抗，而直接免疫荧光的特异性一抗是标记的。间接免疫荧光更常用，优点是高灵敏度和易于改变信号颜色，但可能有交叉反应性，且标记一抗获取较难。直接免疫荧光处理时间短，适用于多抗体来自同一物种的情况，但信号强度较低。