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重组IgG抗体制备服务
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重组IgG抗体制备服务

免疫球蛋白G分子(IgG)是人体血清中含量最高的抗体类型,达到全部类型的80%。一个完整的IgG分子包含两个抗原结合片段(Fab段)和一个可结晶片段(Fc段),Fab段负责特异性识别和结合抗原,Fc段负责介导免疫效应功能,如抗体依赖性细胞介导的细胞毒性、补体依赖的细胞毒性,以及延长抗体在体内的半衰期。根据重链抗原表位的差异以及二硫键数量的不同,IgG有不同的亚型。每种亚型在不同类型抗原刺激下的表达水平、参与免疫反应的方式以及与疾病的相关性均不相同。卡梅德生物拥有自主优化的哺乳动物表达平台,可提供专业、高效、定制化的全类型IgG抗体生产服务。


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图1  IgG结构


卡梅德生物拥有自主优化的哺乳表达平台,可提供专业、高效、定制化的全类型IgG抗体生产服务,支持生产人、鼠、兔、羊驼等多物种来源的IgG全长抗体,卡梅德生物可以为客户提供高质量、高表达量的抗体生产服务,助力抗体发现与开发进程。



服务内容

种属来源

抗体类型

IgG1,IgG2,IgG3,IgG4

IgG1含量最高,达60-65%

小鼠

IgG1,IgG2a, IgG2b, IgG2c,IgG3

只有IgG2a, IgG2b, IgG2c能很好地结合Protein A/G,而IgG1和IgG3结合很弱或不结合

大鼠

gG1,IgG2a, IgG2b, IgG2c

IgG2b和IgG2c能很好地结合Protein A/G,而其他亚型结合能力较差

只有一个IgG类型,但具有高度的多样性

兔IgG与Protein A结合非常强,这是纯化兔多抗的基础

羊驼/骆驼

IgG1,IgG2,IgG3

IgG2,IgG3为重链抗体的分型

表1  不同种属来源的抗体类型


步骤

具体服务内容

周期

Step1:基因克隆及载体构建

1) 扩增抗体基因,插入哺乳动物细胞表达质粒

2) PCR及测序检测确定亚克隆基因

3) 交付:测序数据和实验方案

2-3周

Step2:重组抗体瞬时表达

1) 重组质粒转染细胞(293F,CHO):瞬时表达及纯化

2) SDS-PAGE和WB检测;内毒素分析;ELISA等

3) 交付:表达载体1支,克隆菌株1支,重组抗体0.1-5mg,纯度>85%(SDS-PAGE),实验报告

2-3周

Step3:稳定表达(可选)

1) 稳定表达CHO细胞系构建及筛选

2) 交付:稳定细胞系,构建报告;边际产物,3个克隆,每个克隆50ml发酵产物及纯化产物

12-14周

表2 重组抗体哺乳表达服务内容

案例展示

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服务优势

卡梅德生物致力于为客户提供高品质的重组抗体制备服务,在重组IgG抗体表达方面,从重组表达载体的构建,到最后抗体的亲和纯化,我们拥有较为完善的重组抗体制备体系,可以满足客户对不同种属及类型抗体的需求,实现抗体的批量生产。


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