表位标签

表位标签是一类与目标蛋白融合表达、通过特异性亲和配对或特异性抗体识别实现重组蛋白纯化、检测、追踪与定向的短肽或蛋白序列，是基因工程重组蛋白表达、纯化与检测中最常用的功能性工具分子。此类标签包括：组氨酸标签（His-tag，6×His是最常用形式，利用Ni2+-NTA等固定化金属离子亲和层析进行纯化，并通过抗His单克隆抗体进行Western blot等检测）、FLAG标签（DYKDDDDK序列，无菌操作友好，通过抗FLAG M2磁珠与树脂纯化）、谷胱甘肽转移酶标签（GST-tag，与谷胱甘肽-Sepharose亲和纯化，并可促进蛋白可溶性表达）、麦芽糖结合蛋白标签（MBP-tag，与淀粉层析亲和纯化，显著提升大分子蛋白可溶性表达水平）、链霉亲和素结合标签（Strep-tag II，与Streptavidin亲和纯化）、以及硫氧还蛋白Trx与SUMO/泛素样融合标签（起表达量提升与N端Met-AP介导的特异切除作用）。此外还有c-Myc、HA、V5、V5-His等用于免疫检测的表位标签序列，常与上述纯化标签联用构建双标签或多标签表达载体。表位标签的选择直接影响重组蛋白的表达量、溶解度、纯化收率与抗原性，是抗体与重组蛋白工程化产品的核心设计要素。