1. 可以优化基因吗?
答:卡梅德生物可以提供密码子优化的基因,旨在满足您的确切研究规范。在确认您的订单之前,这些序列始终可供您查看,并且通常包含在项目报价中。
2. 密码子优化如何增强基因合成项目?
答:卡梅德生物的密码子优化工具可以针对多个关键参数进行优化,以稳定 DNA 片段并提高基因表达效率。参数包括但不限于:
--密码子使用偏差
--GC含量
-- mRNA二级结构
--自定义所需模式
--自定义非期望模式
--重复序列(直接重复、倒置重复和二元重复)
--限制性酶识别位点(删除或插入)
请注意,卡梅德生物不能保证蛋白质的最终表达。
3. 亚克隆和PCR克隆的区别?
答:这两种服务都提供从现有的模板质粒克隆插入物到不同的目的质粒。对于我们的亚克隆服务,要克隆的插入物的两侧已经有了用于克隆的限制性位点。这项服务是针对简单的限制/连接。PCR克隆服务是在克隆前需要额外的PCR步骤时提供的。例如,这可能是添加正确的限制性位点的需要。
4. 基因重悬方案
答:对于重悬,我们建议采用以下方法。
--短暂离心试管以确保内容物在试管的底部
--将样品重悬于适合你需要的体积中。
--例如,20-50 µL用于~0.25至~0.1 µg/µL的无菌高纯度水
--重悬溶液取决于下游的应用--TE可能会干扰各种酶的操作
--涡旋一下,让DNA管在冰上放置2-10分钟,然后再涡旋一下
染料 | 最大吸收波长(nm) | 荧光发射最大波长 (nm) | 摩尔消光系数 | 颜色 |
FAM | 495 | 520 | 83000 | 绿色的 |
TET | 521 | 536 | 73000 | 橙色的 |
JOE | 520 | 548 | 71000 | 粉色的 |
HEX | 520 | 548 | 71000 | 粉色的 |
TAMRA | 544 | 576 | 90000 | 玫瑰 |
Cy3 | 550 | 570 | 150000 | 红色的 |
ROX | 576 | 601 | 82000 | 红色的 |
TexasRed | 583 | 603 | 107000 | 红色的 |
Cy5 | 650 | 670 | 250000 | 紫色 |
5. 寡核苷酸如何量化?
答:寡核苷酸最常通过测量其在 260 nm 处的 UV 吸光度来定量。以 33 µg/ml 的浓度溶解在中性水溶液中的单链寡核苷酸在 260 nm 处的吸光度约为 1.0 AU 光密度 (OD) 单位定义为吸光度(在 1 cm 处的 260 nm 处)比色皿)乘以样品体积(以毫升为单位),因此 1 OD 单位大约是 33 µg ssDNA。
6. 什么是合成规模和收率?
答:合成规模是指合成介质上游离 3'-末端的起始量,通常以 nmol 为单位,例如 25 nmol、50 nmol 等。 产量是指在所有合成和纯化步骤完成后回收的最终产物的量完全的。产量通常以 OD 来衡量,例如 3 OD、5OD 等。
7. 得到的寡核苷酸数量是否与量表中指示的数量相同?
答:不。客户订购的合成规模表示开始合成寡核苷酸的 3' 碱基数量。由于寡核苷酸合成(或任何化学反应)从来都不是 100% 有效的,因此合成和纯化步骤后回收的最终产物量(产量)将始终小于用于合成的起始量。产量取决于寡核苷酸的大小、偶联效率和碱基组成。修饰、二级结构和纯化服务进一步影响最终产量。卡梅德生物提供基于所有这些因素的保证产量,这些因素定义了您收到的最低寡核苷酸数量。通常情况下,合成产生的材料比保证的最低限度多,但是,如果您的实验需要的材料超过最低限度,那么我们强烈建议您使用更高的合成规模。
卡梅德生物技术公司致力于提供全面的从基因合成到蛋白表达的一站式服务,专为科研界和生物制药行业设计。我们的服务流程开始于基因的精准合成,根据客户提供的序列信息或目标蛋白,进行专业的基因设计和优化,以保证高效的蛋白表达。随后,通过先进的载体构建技术,将合成的基因稳定地插入适合的表达载体中,并选择最合适的宿主系统(包括细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞等)进行蛋白质的生产。 在蛋白表达阶段,我们利用最新的生物技术和表达优化策略,确保高水平的蛋白产量及正确的蛋白折叠。接着,通过多种纯化技术,如亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤等,对表达的蛋白进行高度纯化,同时进行严格的质量控制测试,以确保蛋白的纯度和活性。最后,我们还提供蛋白质的功能性分析服务,包括酶活性测试、结合活性测试和免疫活性分析等,全面支持客户的科研项目和药物研发工作。 凭借专业的技术团队和丰富的行业经验,卡梅德生物技术公司成为您可靠的合作伙伴,助力您的科研创新和生物制药项目的成功。