大肠杆菌(E.coli)重组蛋白表达技术经过多年的发展,相对于其他表达体系,算是非常成熟的一个体系。想要在大肠杆菌表达体系获得不错的可溶以及高产量的蛋白表达,一个优秀的表达策略必不可少。卡梅德生物科技的专家在蛋白表达和抗体制备方面具有独到的经验和丰富的知识储备,对每一个客户提出的特殊要求,我们尽可能提出完美的解决方案。
常见的重组蛋白表达技术问题汇总
重组蛋白表达永远不是一蹴而就的事情,任何一种方案不会适用于所有案例,如表1所示,总结了一些常见的蛋白表达技术问题及其应对策略。重组蛋白原核表达体系如何选择宿主系统、表达质粒系统及培养体系,详情请参考重组蛋白原核表达服务。
表2 常见E.coli蛋白表达系统技术问题与策略汇总
问题 | 可能的原因 | 解决策略 |
无或低蛋白表达 | 诱导前,蛋白有毒性 | 控制本底表达水平: |
诱导后,蛋白有毒性 | 控制诱导表达水平: | |
密码子偏爱 | 优化质粒DNA密码子,以适应宿主密码子体系 | |
包涵体形成 | 不正确的二硫键形成 | • 采取分泌性表达策略 |
不正确的折叠 | 共表达分子伴侣 | |
低可溶性蛋白形成 | • 改变融合伴侣蛋白,促进可溶蛋白表达 | |
需要至关重要的翻译后修饰 | • 改变表达宿主,如原核改变成真核表达系统 | |
蛋白无活性 | 不正确的折叠 | • 低温诱导表达 |
cDNA突变 | • 质粒诱导表达前后测序 |
卡梅德生物作为专业生物技术服务提供商,致力于为客户提供高质量的原核蛋白表达服务。我们拥有先进的实验设施和经验丰富的科学团队,能够针对客户的需求,提供定制化的原核蛋白表达解决方案。我们采用最新的基因克隆技术和表达系统,确保目标蛋白质以高效、可靠的方式在原核表达系统中进行表达,并进行纯化和功能鉴定。无论是小规模的实验室研究还是大规模的工业生产,我们都能够满足客户的需求,并提供高水平的技术支持和服务保障。通过选择卡梅德生物的原核蛋白表达服务,客户可以获得高质量的蛋白样品,为其科研和应用领域的进展提供可靠的支持。